На 7 сутки снижается ИМЯ фибробластов ран. Особенно снижение ИМ
фибробластов в ранах, обрабатываемых ЭВР. Так, у контрольных животных
ИМЯ составили 7,0 + 0,6 % , у подвергнутых лазерному облучению -
8,1+0,4 %,а у обработанных ЭВР4,8+0,6 (Р< 0,05)(рис.2.22). Это сопро-
вождается уменьшением включения 3Н-тимидина в ядра эндотелия микросо-
судов грануляционной ткани и перициты.
ИМЯ эпидермиса как у контрольных,так и у животных,подвергнутых
лазерному излучению,обработке ЭВР и комплексному воздействию,продолжал
оставаться довольно высоким.Он составил соответственно 16,2 + 0,7%,
17,1 + 0,5%, 20,9+0,2%, (Р<0,01), 20,2+-0,8%,(Р< 0,01) (рис.2.23).
Электронномикроскопические исследования показали,что в эти сроки
в ранах преобладают зрелые фибробласты и клетки типа фиброцитов.Они
окружены довольно мощными пластами волокон, зачастую с выраженной по-
перечной исчерченностью. Довольно многочисленны фибробласты и клет-
ки,которые по своей форме и ультраструктурными признакам - развитию
зернистой эндоплазматической сети, комплекса Гольджи можно отнести к
клеткам фибробластичекого ряда. Они содержат в цитоплазме значительное
число образований типа фагосом. Иногда во внутриплазматических вакуо-
лях можно различить коллагеновые волокна.Возможно, что эти клетки
представляют собой клетки типа фиброкластов, которые в этот период ра-
невого процесса принимают участие в резорбции и перестройке соедини-
тельнотканного рубца.
Стереометрическое определение относительного объема, занимаемого
в поверхностных слоях ран различными типами клеток,показало,что через
10 суток домирующим типом клеток раны являются фибробласты и макрофа-
ги. В ранах, подвергнутых комплексной обработке,объем фибробластов
снижается, количество же макрофагов возрастает. В ранах контрольных
животных увеличивается объем, занимаемой лимфоцитами. У крыс, раны ко-
торых обрабатывались ЭВР и подвергались комплексному воздействию, наб-
людается дальнейшее снижение лимфоцитов.Увеличение объема бесклеточных
зон в ранах, облучаемых ГНЛ, орошаемых ЭВР и подвергаемых комплексному
воздействию, связано с увеличением волокнистых структур. (таб. 2.6.).
Таблица 2.7.
ОТНОСИТЕЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КЛЕТОК (В %) ПОВЕРХНОСТНЫХ СЛОЕВ РАН
НА 10 СУТКИ ПОСЛЕ ДЕРМАТОМИИ
Ш1
----------------------T----------------------T-----------------------
Вид воздействия | Физ. раствор | ЭВР
Тип клеток | |
----------------------+----------------------+-----------------------
1. Бесклеточные зоны 12,7+0,65 18,4+0,56
Р/_0,05
2. Жировые клетки 0 0
3. Сосуды в т.ч. 21,3+0,54 18,9+0,87
эндотелий Р/_0,05
4. Внесосудистые
эритроциты 0 0
5. ПЯЛ 1,0+0,34 х 0,0+0,00
Р/_0,05
6. Лимфоциты 10,8+0,41 х 8,5+0,34
Р/_0,05
7. Фибробласты 16,9+0,63 16,5+0,47
Р/_0,1
8. Макрофаги 10,9+0,58 11,7+0,58
Р/_0,1
9. Плазмобласты и 8,3+0,44 х 8,8+0,47
плазмоциты Р/_0,1
10. Эозинофилы 7,5+0,31 х 8,4+0,44
Р/_0,05
11. Лаброциты 6,0+0,37 х 6,5+0,47
Р/_0,1
12. Моноциты и неэтериф. 4,2+0,83 хх 2,1+0,44
кислоты Р/_0,05
---------------------------------------------------------------------
ш0
Примечание: В случаях, отмеченных (х), критерий Стьюдента исполь-
зовался для оценки отличий от нуля средней разности в парах
В случаях, отмеченных (хх) использовался критерий знаков.
На 10 сутки после нанесения дерматомных ран диаметром 0,95см2 у
крыс, обработанных ЭВР и подвергнутых комплексному воздействию,имеет
место почти полная эпителизация раневой поверхности. У контрольных жи-
вотных она составила 0,64 + 0,04 (при исходном 0,95 см2), обработанных
ЭВР - 0,14 + 0,01 , облученных ГНЛ - 0,18 + 0,1 ,подвергнутых комп-
лексной обработке - 0,12 + 0,04 см2 (рис 2.1).
В рубцовой ткани преобладали фиброциты и макрофаги. Последние на-
ходятся в тесном контакте с коллагеновыми волокнами. В некоторых ваку-
олях, содержащихся в цитоплазме макрофагов , определяются остатки кол-
лагеновых волокон.
В эпидермисе ран, обработанных ЭВР и особенно подвергнутых комп-
лексному воздействию ГНЛ и ЭВР, на плазматических мембранах клеток ши-
поватого слоя определяется довольно много десмосом. В цитоплазме кле-
ток большое число тонофиламентов.
На 14 сутки раны с исходной площадью 0,95 см2 полностью эпители-
зировались как в случае обработки ЭВР, облучения ГНЛ, так и подвергну-
тые комплексному воздействию . Значительно сократилась и площадь ран
исходных размеров 7,2 см2. При этом наименьшие размеры имели раны,
подвергнутые комплексному воздействию. Их площадь была почти в два ра-
за меньше , чем в ранах контрольной группы.
В тканях ран в эти сроки также доминирующими клетками были фибро-
циты. Довольно часто встречались макрофаги с большим числом разнооб-
разных телец в цитоплазме и зонами, содержащими коллагеновые волокна.
Наряду с исследованиями дерматомных ран проведено также изучение
влияния ЭВР, ГНЛ и ЛЭР (комплексной обработки электронно-активирован-
ной водой-лазером) на заживление линейных хирургических ран. В отличие
от дерматомных ран, представляющих собой модель заживления ран вторич-
ным натяжением, хирургические линейные паны заживают, как правило,
первичным натяжением.
В ранние сроки наблюдения в области разреза встречаются мигриро-
вавшие клетки элементы, главным образом нейтрофильные лейкоциты и лим-
фоциты. У контрольных животных в области раневого канала довольно
большое количество прядей фибрина и клеточного детрита. У животных,
подвергнутых обработке ЭВР, ГНЛ и комплексному воздействию, встреча-
лись отдельные макрофаги, ПЯЛ, довольно много гликогена (рис.58).
Проведенные радиографические исследования включения зН-тимидина в
фибробласты в области раневого канала и близлежащих базальных клеток
эпидермиса показали, что ЭВР вызывает существенное увеличение ИМЯ как
фибробластов, так и эпидермиса. Облучение линейных ран гелий-неоновым
лазером также вызывает заметное возрастание пролиферативной активности
фибробластов и эпидермиса у краев раневого канала. Так, через 3 суток
после нанесения линейной раны ИМЯ фибробластов составил 2,1+0,3% у жи-
вотных, раны которых орошались физиологическим раствором. У крыс, раны
которых обрабатывались ЭВР, ИМЯ был равен 7,2+0,4% (Р<0,01). ИМЯ ба-
зальных клеток слоя эпидермиса соответственно составил 17,6+0,9% и
27,1+0,6% (P<0.01). ИМЯ фибробластов ран, облучаемых красным светом
(контрольная группа), составил 2,8+0,3%, а при облучении ГНЛ -
5,9+0,4% (P<0,01). Имя базальных клеток эпидермиса составил соответс-
твенно 19,8+0,7% и 24,3+0,4% (P<0,01). При комплексной обработке ли-
нейных ран ЭВР с последующим облучением ГНЛ ИМЯ фибробластов составил
7,9+-0,3% (Р<0,01), а эпидермиса - 27,8+0,5% (Р<0,01).
Через 6 суток после нанесения раны ИМЯ фибробластов при обработке
раны физиологическим раствором составил 4,7+0,4% ЭВР - 8,0+0,5%
(P<0,01), при облучении красным светом - 5,6+0,3%, ГНЛ - 6,9+0,6%
(P<0,05) и комплексной обработке ЛЭР - 9,6+0,5% (P<0,01), эпидермиса
соответственно 19,4+0,7%, 21,2+0,4, 20,4+0,5% (Р<0,05) . Через 10 су-
ток ИМЯ фибробластов ран, обработанных физиологическим раствором, был
равен 4,1+0,5%, ЭВР - 8,0+0,4% (Р<0,01), красным светом - 3,9+0,3% и
после комплексной обработке ЛЭР - 2,3+ 0,2%, а эпидермиса соответс-
твенно 12,0+0,6%, 10,6+0,3% (P<0,05), 7,9+0,4% (P<0,01). Через 14 су-
ток ИМЯ фибробластов был у контроьных животных, 4,0+0,5%, орошаемых
ЭВР - 2,4+0,4% (P<0,05), облучаемых ГНЛ - 2,5+0,3% (P<0,05) и ЛЭР -
1,6+0,2% (P<0,01), эпидермиса соответственно 10,1+0,6%, 8,7+0,4%, 6,6+
0,4 (P<0,01) (рис.2.60).
На 6 сутки в линейных ранах контрольных животных имеет место на-
ползание эпителиального пласта на рубец, но полной его эпителизации не
отмечается. В ткани рубца многочисленные крупные образования типа ва-
куолей, встречаются гигантские клетки инородных тел (рис.2.61).
При облучении ГНЛ отмечается полная эпителизация раны несколькими
рядами эпителиальных клеток, но со слабо выраженными процессами орого-
вения. В рубцовой ткани также встречаются вакуоли и гигантские клетки
инородных тел. В ранах , орошаемых ЭВР, место рубца покрыто многослой-
ным эпидермисом с выраженными явлениями кератинизации в клетках по-
верхностного слоя. От базального слоя клеток в рубцовую ткань выступа-
ют тяжи клеток, возможно, представляющие собой формирующиеся придатки
кожи. В то же время у контрольных животных ,а также у крыс, облучаемых
ГНЛ, рубцовая ткань не содержит структур, свойственных придаткам кожи.
Электронномикроскопические исследования показали, что ультраст-
руктурные изменения фибробластов ран, подвергнутых обработке ЭВР, ГНЛ
и комплексному воздействию, схожи с таковыми у фибробластов грануляци-
онной ткани дерматомных ран. Гелий-неоновый лазер, наряду с увеличени-
ем пролиферативной активности фибробластов, вызывает возрастание в их
цитоплазме профилей зернистой эндоплазматической сети, структур комп-
лекса Гольджи. Уже в ранние сроки наблюдения (3 суток) в области ране-
вого канала преобладающим типом фибробластов являются зрелые фиброб-
ласты с ультраструктурными признаками активного гетеросинтеза.
В еще большей степени это выражено при обработке ран ЭВР и осо-
бенно при комплексном воздействии ЭВР и лазера. В цитоплазме большинс-
тва фибробластов многочисленные профили зернистой эндоплазматической
сети расширены, в них определяется содержимое умеренной электронной
плотности, клетки с многочисленными отростками и неровностями плазма-
тической мембраны. Отмечается тесный контакт волокон с плазматической
мембраной клеток. Ядра фибробластов находятся в различных структур-
но-функциональных состояниях. В одних ядрах преобладает гетерохрома-
тин, в других - эухроматин, равномерно расположенный по кариоплазме. В
области раневого канала имеется довольно много микрососудов. Многие
ядра эндотелиальных клеток интенсивно включают зН-тимидин. Ультраст-
руктура цитоплазмы эндотелиальных клеток свидетельствует об интенсив-
ности аутосинтеза. В них многочисленные полисомы, отдельные профили
зернистой эндоплазматической сети и структур комплекса Гольджи.
В ранах животных, орошаемых ЭВР и подвергнутых комплексной обра-
ботке, в эти сроки встречаются ПЯЛ, имеющие ультраструктурные признаки
активации функции. Наблюдается выход их секреторных гранул в межкле-
точное пространство. Здесь они располагаются свободно среди нежных во-
локон типа коллагеновых. В цитоплазме ПЯЛ отчетливо определяется комп-
лекс Гольджи и многочисленные гранулы гликогена. Комплекс Гольджи в
ПЯЛ контрольных животных встречается чрезвычайно редко. Его практичес-
ки трудно наблюдать в циркулирующих ПЯЛ.
В краях ран, орошаемых ЭВР, многочисленны зрелые, активно синте-
зирующие коллаген фибробласты, контактирующие с тучными клетками и эо-
зинофилами. В миоцитах, прилежащих к ране, встречаются структуры комп-
лекса Гольджи, свободные полисомы.
На 5 сутки нанесения раны у контрольных животных встречается зна-
чительное число зрелых, активно синтезирующих коллаген фибробластов. В
ранах животных, обработанных ЭВР, облученных ГНЛ и подвергнутых комп-
лексному воздействию ЛАР, зрелые, активно синтезирующие коллаген фиб-
робласты являются доминирующими соединительнотканными клетками. Однако
довольно многочисленны макрофаги , тучные клетки и эозинофилы. Макро-
фаги обладают ультраструктурными признаками, свидетельствующем об ак-
тивном фагоцитозе. Плазматическая мембрана образует многочисленные вы-
росты и инвагинации, в цитоплазме большое число фагосом, отдельные
профили гранулярной эндоплазматической сети и структур комплекса Голь-
джи.
На 7-10 сутки у контрольных животных все еще довольно велико чис-
ло зрелых, активно синтезирующих коллаген фибробластов. В то время как
у животных, раны которых обрабатывались ЭВР, ГНЛ и подвергались комп-
лексному воздействию, такие фибробласты практически не встречаются , а
доминируют клетки типа фиброцитов, располагающиеся среди пучков воло-
кон.
Довольно часто встречаются клетки типа фибробластов, в цитоплазме
которых имеются вакуоли с наличием в них волокон, имеющих поперечную
исчерченность.